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技术支持
蛋白SDS-PAGE电泳及定量在蛋白质技术手册

储存液配制(注意配方和实际测定参数!!!)

(1)2 M Tris-HCl (实测pH 8.9±0.1,25℃) 500 mL:121 g Tris base加350 mL双蒸水解,以玻璃棒搅拌约1 min,缓慢加入浓盐酸(11.8 M)20 mL,继续搅拌均匀,并使Tris全部溶解,溶液澄清,加入适量双蒸水至500 mL,倒入无色玻璃试剂瓶中,4℃冰箱保存。

(2)100 g/L SDS 溶液:10 g SDS (要求高纯度,其质量明显影响电泳效果)加100 mL双蒸水,于洁净的250 mL烧杯中进行微波加热溶解,注意不要爆沸,间歇用玻璃棒搅拌以加速溶解,完全溶解后的溶液应清澈透明无色。倒入无色玻璃试剂瓶中,4℃冰箱保存。冰箱取出后可微波加热促进储存液的溶化。

(3)75%(v/v)甘油:于500 mL量筒中倒入分析纯甘油300 mL,加双蒸水100 mL,以一次性塑料手套封口,颠倒量筒使甘油完全溶解,然后倒入无色玻璃试剂瓶中,4℃冰箱保存。

(4)10 g/L 溴酚蓝溶液:500 mg溴酚蓝加双蒸水50 mL,搅拌溶解,倒入棕色玻璃试剂瓶中,4 ℃冰箱保存。不用过滤。用时注意吸取上层澄清液,不要吸到沉淀。

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